Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的步骤中逐渐扩展

从第一次成现肝细胞自身特异性到成现1同型乳癌病理病征的令人满意叛将在青不算年时代就有极好的阐述，多个肝细胞自身特异性里面性的青不算年里面有70%在血清变换后10年内患病乳癌，而随访15年的青不算年这一%上升到84%。相对来说，占到病理1同型乳癌一半以上的同型1同型乳癌的发病有助于还没有人取得必要的研究成果。

越来越多的人开始用于分期系统来界定1同型乳癌的令人满意：个基底在成现多种肝细胞自身特异性时进入第1之前，成现血糖极其时进入第2之前，成现病征时进入第3之前。一些多发肝细胞自身特异性里面性的个基底，在1期和2期，令人满意较迟，并发展为发病的1同型乳癌。我们在此之前阐述了一组在首次侦测到多种肝细胞自身特异性抽样后多于10年无乳癌的极迟令人满意者，这组病征次数不算，但特点相当具体。随后，我们注意到肝细胞自身特异性特异性CD8+T线或粒基底化学反应在令人满意较快的病征里面大体上不共存，但在近来发病和长期共存的乳癌病征里面很容易侦测到。这也许声称，与令人满意病征相比，这些病征自身免疫化学反应的抑制增强。

早期研究成果声称，尽管抑制性T线或粒基底(Treg)数量正常，但乳癌病征共存一些特性缺陷，其里面包括对IL-2的化学反应能力下降。此外，乳癌病征里面的物理现象CD4+T线或粒基底也许对抑制更为具抵抗性，表现为物理现象T线或粒基底的依赖性减弱，自然产生的Treg和粘液产生的诱导Treg，以及特异性历程的CD4+T线或粒基底里面IL-2化学反应减弱。本研究成果的目的是阐述了CD4+抑制性T线或粒基底(Treg)在海岸边极较快令人满意者里面的特点，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

步骤：BOX研究成果是一项以成年人依此的斜向研究成果，在21岁请注意确诊的病征亲属里面侦测1同型乳癌的脆弱环境因素。我们在此之前阐述了长期较快令人满意者的特点，他们保持多重肝细胞自身特异性里面性少于10年，但没有人成现乳癌的病理病征，迟性或非同步性虐待自身免疫。随后，10名继续保持无乳癌并愿意提供大量血液抽样的较快令人满意者划定T和B线或粒基底特性分析。在现在的研究成果里面，8名迟令人满意者(SP组)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的肝细胞自身特异性里面性。所有的参与者都所处1同型乳癌令人满意的1期，尽管一些人随后得不到了肝细胞自身特异性对某些特异性的里面性化学反应，然而，一名病征不太可能所处2期多于6年，但没有人成现病理病征，一名病征被治疗为乳癌，该受试者72岁，在采集实验抽样时，其HbA1c急剧下降到53 mmol/mol(7%)，在数据分析里面对该NADP同步进行了分开评估。分离外周血单个核线或粒基底(PBMCs)，采用多参数流式线或粒基底妖术和T线或粒基底依赖性试验评估NADP里面Treg的频叛将、表同型和特性。用于FlowSOM和CITRUS(聚类认定、表征和回归)同步进行无监督聚类分析，评估Treg表同型。

结果：与心理健康NADP相比，来自迟令人满意基底的遗忘CD4+T线或粒基底的监督聚类显示，介导的遗忘CD4+ Treg频叛将上升，与糖皮质激素诱导的TNFR关的蛋白(GITR)传达上升有关。一名HbA1c急剧下降的病征与令人满意较快者和匹配的比对组相比，Treg谱有所不尽相同。特性分析声称，与心理健康NADP相比，来自较快令人满意基底的Treg介导的CD4+物理现象T线或粒基底依赖性明显受到破坏。表现为对物理现象CD4+T线或粒基底CD25和CD134传达的依赖性上升。

平面图1 深入的表同型分析显示，CD4+Treg亚同型在迟令人满意字段里面上升。由FlowSOM降解的Treg一楼，组织起来在来自所有NADP的活CD4+CD45RA -线或粒基底上。根据标有物传达认定成10个元簇:遗忘T线或粒基底_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T线或粒基底;HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒基底;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)用于9个不尽相同Treg标有降解的10个元簇的MST。每个节点都有一个空降兵(100个空降兵)，更为大的元空降兵(10个元空降兵)在节点组周遭上色。每个节点里面的饼平面图问到单个标有的传达级别。(b)每个元聚类的热平面图，以显示整基底标有传达。(c, d)为HD组(c)和SP组(d)降解平面图，以及FlowSOM辨识的每个元簇的覆盖物。(e-l)一般来说同位素为每个metacluster箱内线或平面图(同位素> 0.05%)已确定为HD和SP组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒基底(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T线或粒基底(l)。红色带子都有**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩鉴定。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 用于CITRUS的预测模同型证实，Treg频叛将的上升是令人满意较快的标志。评定门控(a - f)和柑橘分析(g-k)相当SP参与者和匹配的HD参与者在CD4+CD45RA−T线或粒基底上的差异。(a)基因型CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群基底的权威性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3钼，然后通过HLA-DR和GITR传达同步进行分离，模拟FlowSOM群基底。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)组以及NADPSP 606(红色)里面CD25+ cd127的频叛将汇总平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控弟集的箱内线或平面图;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)棉花簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达强度着色，箭头突成的簇被辨识为SP和HD字段两者之间的不尽相同。(j)箱内线或平面图显示了在SP(蓝点)和HD(灰点)组里面，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的一般来说同位素(%)。(k)直方平面图显示每个簇的表同型(蓝色)和Treg标有一般来说传达与着重传达(红色);上列，存储器Treg_3;下面一行，存储器Treg_4。着重与所有其他簇里面标有的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩鉴定

平面图3 与心理健康献血者相比，令人满意较快者遗忘treg的GITR上升。每个遗忘CD4+T线或粒基底元簇(遗忘T线或粒基底_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T线或粒基底;HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒基底;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个传达标有的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的传达热平面图(sp606不包括在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR传达串联，显示直方平面图(c)和汇总平面图(d)。Wilcoxon配对符号秩和鉴定，p< 0.07(红色)所有NADP包括，p< 0.05(红色)NADPSP 606和匹配的HD不包括在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR传达，从评定门控，从所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(红色)串联，显示直方平面图(e)和汇总平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩鉴定

平面图4 来自较快令人满意的CD4+ treg线或粒基底控制物理现象CD4+T线或粒基底的能力下降。SP组用红色的线或和带子问到，HD组用黄色的线或和带子问到，红色的线或/带子问到NADPsp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒基底同步进行分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标有为CFSE, Treg按推论的%化学反应物。用抗CD3 /28微珠诱导线或粒基底，养成3几天后同步进行流式线或粒基底妖术侦测。(a-d)与CD4+反之亦然者一般来说应的treg养成(自基底)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者养成。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE依赖性百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的依赖性百份。用于里面性比对(介导的组织起来线或粒基底仅有treg)量度依赖性百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

平面图5 物理现象CD4+T线或粒基底对较快令人满意的T线或粒基底诱导的依赖性更为极端。SP组用红色的线或和带子问到，HD组用黄色的线或和带子问到，红色的线或/带子问到NADPsp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒基底同步进行分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标有，treg按推论的%化学反应物。用抗CD3 /28微珠诱导线或粒基底，养成3几天后同步进行流式线或粒基底妖术(CD25反染)和线或粒基底因弟分析。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者联合养成。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE依赖性百分叛将(b)。(c,d) CD25依赖性百分叛将(c)和CD134依赖性百分叛将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成里面的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

事实：我们得成的事实是，来自较快令人满意弟的诱导遗忘CD4+Treg在GITR传达里面取得了扩张和丰富，强调了全面研究成果Treg在1同型乳癌高风险个基底里面的异质性的实质。

中文翻译成处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28